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細(xì)胞因子試劑盒檢測前的準(zhǔn)備工作,需謹(jǐn)慎!

2020-03-12 瀏覽次數(shù):1716

   細(xì)胞因子試劑盒主要用于科研方面,不用于臨床診斷,可以用于檢測各種指標(biāo)。做快速檢測時,待檢測的樣品數(shù)越多,出現(xiàn)加錯的概率也就越大,特別容易出錯的是在酶聯(lián)偶合物(conjugate)與樣品液或標(biāo)液混合的階段,因為這時使用的是單道槍。其實解決的方法比較簡單,我們只要把操作上的順序加以調(diào)換,即先把待測液或標(biāo)液加入稀釋孔中,再加入酶聯(lián)偶合物就不會出現(xiàn)錯誤了。而且這兩個順序交還對結(jié)果也沒有影響,因為這一步的主要目的是讓兩種液體充分混合。
  細(xì)胞因子試劑盒檢測前準(zhǔn)備工作:
  1. 請?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒,平衡至室溫。
  2. 將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:25)。未用完的放回4℃。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,可用40℃水浴微加熱使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液(加熱溫度不要超過50℃,使用時洗滌液應(yīng)為室溫)。當(dāng)日使用。
  3. 標(biāo)準(zhǔn)品: 于10000×g離心1分鐘,加入標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液1.0mL至凍干標(biāo)準(zhǔn)品中,旋緊管蓋,靜置10分鐘,上下顛倒數(shù)次,待其充分溶解后,用移液器將其輕輕混勻(濃度為8000pg/mL)。然后根據(jù)需要進(jìn)行倍比稀釋(注:不要直接在反應(yīng)孔中進(jìn)行倍比稀釋)。建議配制成以下濃度:按照稀釋方法圖例 標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液直接作為空白孔0ng/mL。如配制5ng/mL標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5mL10ng/mL的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5mL標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液的EP管中,混勻即可,其余濃度依此類推。
  4. 生物素化抗體工作液:實驗前計算當(dāng)次實驗所需用量(以100μL/孔計),實際配制時應(yīng)多配制100-200μL。使用前15分鐘,以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體(1:100)成工作濃度。當(dāng)日使用。
  5. 酶結(jié)合物工作液:實驗前計算當(dāng)次實驗所需用量(以100μL/孔計),實際配制時應(yīng)多配制100-200μL。使用前15分鐘,以酶結(jié)合物稀釋液稀釋濃縮HRP酶結(jié)合物(1:100)成工作濃度。

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